logo

Kompletna krvna slika

Test krvi uključuje definiciju:

- broj leukocita

- određivanje brzine taloženja eritrocita

Laboratorijski testovi krvi

Pružanje kvalitetnih hematoloških studija moguće je uz standardizaciju predanalitičkih i analitičkih faza rada.

Preanalitičke pogreške 68,2%

Analitičke pogreške 13,3%

Postanalitičke pogreške od 18,5%

Čimbenici koji utječu na krvnu sliku

- fizički i emocionalni stres

- sezonski, klimatski, meteorološki uvjeti

- aktivnost pacijenta i položaj tijela u trenutku uzimanja krvi.

Hemoglobin i hematokrit kod bolesnika u ležećem položaju smanjeni su za oko 6%. Teška proljev i povraćanje mogu dovesti do značajne dehidracije i hemokoncentracije.

Učinak dnevnog bioritma na krvnu sliku

- koštana srž je najaktivnija ujutro

- slezena i limfni čvorovi oko 17 - 20 sati

- maksimalni hemoglobin u krvi opažen je od 11 do 13 sati, a najmanje od 16 do 18 sati;

- eozinofili su najniži ujutro između 9 i 11 sati, a vrh eozinofila javlja se do 3 sata ujutro.

Krvne pretrage se moraju obaviti (osim u hitnim slučajevima) da bi se postigli usporedivi rezultati.

Uzimanje i priprema materijala za istraživanje:

Uzimam krv

- Na točnost i točnost rezultata utječe tehnika uzimanja uzoraka krvi, korišteni instrumenti (igle, oĉvrsivači itd.), Epruvete u koje se uzorkovanje provodi, a zatim pohranjuju i prevoze.

- Standardizacija predanalitičkog stupnja primjenom standardiziranih komercijalnih potrošnih materijala za hvatanje, skladištenje i transport bioloških uzoraka, standardnih reagensa i dijagnostičkih sustava može značajno poboljšati točnost i točnost istraživanja.

Za opću kliničku analizu uzeta je krv:

- kod novorođenčadi - iz pete

Krvni testovi se preporučuju ujutro na prazan želudac, prije vježbanja i raznih dijagnostičkih postupaka, lijekova, osobito kada se daju parenteralno.

- Najbolji način za aspiraciju krvi su vakuuteri (vakuumski sustavi za prikupljanje krvi - Terumo, BD):

- sadrže određenu količinu antikoagulanta i daju standardne uvjete za aspiraciju volumena cijele krvi

- brzo i kvalitetno prikupljanje krvi bolesnika

- smanjenje vremena prikupljanja krvi za 30-50%

- krv in vitro ne podliježe hemolizi

- jedna venepunkcija je dovoljna da uzme krv u nekoliko epruveta

- nema izravnog kontakta medicinske sestre ili laboratorijskog tehničara s krvlju pacijenta, što osigurava prevenciju virusnih infekcija koje se prenose parenteralnim putem.

- Uzimanje uzoraka krvi štrcaljkom bez antikoagulanta nakon čega slijedi transfuzija u epruvetu je neprihvatljivo:

- kontakt krvi sa stijenkama štrcaljke dovodi do stvaranja agregata trombocita

- teško održavati točan omjer krvi / antikoagulanta

- pritisak u igli povećava vjerojatnost hemolize i prskanja krvi

- kršenje integriteta i sterilnosti uzorka

- - vjerojatnost infekcije osoblja

Za hematološka ispitivanja preporučuje se uzimanje kapilarne krvi u sljedećim slučajevima:

- male ili teško pristupačne vene

- sklonost venskoj trombozi

- Nakon probijanja prsta, nekoliko kapi krvi (najmanje 3-4) spušta se na pojedinačno stakleno staklo ili gnijezdo plastične tablete, miješa se i koristi za rad.

- Krv je sakupljena od strane pojedinačne, sterilne Panchenko kapilare, prethodno navlažene natrijevim citratom.

- Nakon punkcije kože prsta, 6-8 kapi krvi ispušta se u plastičnu epruvetu s antikoagulantom K2EDTA ili K3EDTA (Trilon B) u količini od 1,5-2,2 mg po 1 ml krvi, ili
posebne plastične epruvete za jednokratnu upotrebu, tretirane K2EDTA (tvrtka "De-ta-ab", "Sarstedt", "Becton Dickinson", itd.). Odmah nakon uzorkovanja potrebno je temeljito miješati, okretati cijev s poklopcem najmanje 10 puta.

antikoagulans:

- K2EDTA ili K3EDTA (dvo- ili tri-kalijev etilendiamintetraacetat ili Trilon B)

- EDTA je preferirani antikoagulant pri izračunavanju krvnih stanica pomoću automatskih hematoloških analizatora. Koncentracija EDTA u uzetoj krvi trebala bi biti konstantna i trebala bi iznositi 1,5 - 2,2 mg / ml krvi (na primjer, za postizanje omjera 1,5 mg / ml u epruveti namijenjenoj za 2 ml krvi, ulijte 0,04 ml. % otopine K2EDTA ili K3EDTA). Nedostatak antikoagulanta dovodi do mikrokoagulacije krvi i stvaranja ugruška, višak - je uzrok povećanja osmotskog tlaka krvi i stanica koje se smanjuju. Kod nekih bolesnika može doći do neznatne spontane agregacije trombocita ili, rjeđe, tzv. Pseudotrombocitopenije (imunske prirode) ovisne o EDTA. Upotreba Na2EDTA se ne preporučuje zbog slabe topljivosti u krvi.

- Heparin je najbolji antikoagulant za određivanje osmotske rezistencije crvenih krvnih stanica i funkcionalne studije bijelih krvnih stanica, uključujući brojne testove s imunološkim biljezima. Značajka djelovanja ovog antikoagulanta je sposobnost da se spriječi hemoliza što je više moguće. Mrlje pripremljene od heparinizirane krvi i oslikane prema Romanovskom, imaju plavičastu pozadinu.

- Natrijev citrat je antikoagulant izbora u istraživanjima koagulacije krvi i funkcije trombocita.

Upotreba heparina ili natrij citrata kao antikoagulanata popraćena je promjenama u staničnoj strukturi i stoga se ne preporučuje za proučavanje morfologije krvnih stanica, štoviše, heparin ne sprječava agregaciju stanica, stoga nije preporučljivo koristiti ga za brojanje leukocita i trombocita.

Isporuka, skladištenje i priprema uzorka za studiju:

- Testiranje krvi treba provesti ili neposredno nakon uzimanja (isključena je mogućnost spontane agregacije trombocita), ili 25 minuta kasnije (vrijeme potrebno za prilagodbu trombocita antikoagulantu), a najkasnije 6 sati nakon uzimanja krvi.

- Ako je potrebno provesti kasniju analizu (prijevoz na velike udaljenosti, tehnički kvar uređaja, itd.), Uzorci krvi pohranjuju se u hladnjaku (4 ° - 8 ° C) i pregledavaju u roku od 24 sata. Krv se ne može zamrznuti.

- Test krvi na uređaju provodi se na sobnoj temperaturi. Krv pohranjena u hladnjaku mora se zagrijati na sobnu temperaturu, jer se viskoznost krvi povećava na niskim temperaturama, a oblikovani elementi imaju tendenciju da se drže zajedno, što pak dovodi do narušenog miješanja i nepotpune lize. Ispitivanje hladne krvi može uzrokovati obilježavanje tričlanom diferencijacijom leukocita zbog kontrakcije histograma leukocita.

- Kod obavljanja hematoloških studija na znatnoj udaljenosti od mjesta prikupljanja krvi, problemi se neizbježno javljaju zbog nepovoljnih uvjeta prijevoza. Izloženost mehaničkim faktorima (trešenje, vibracije, miješanje, itd.), Temperaturne smetnje, vjerojatnost izlijevanja i kontaminacija uzoraka mogu utjecati na kvalitetu analiza.

- Da bi se uklonili ovi uzroci, preporuča se koristiti hermetički zatvorene plastične epruvete, posebne transportne izolirane spremnike, kada se cijevi transportiraju krvlju.

Analiza LE stanica (krv s EDTA)

LE stanice (krv s EDTA)

Što su LE stanice?

LE stanice su neispravni neutrofili s nuklearnim inkluzijama leukocita koje su lizirali. Ime tih stanica daje se nakon prvih slova latinskog naziva za sistemski eritematozni lupus (Lupus erythematosus), budući da su prvi put identificirani u bolesnika s ovom bolešću. Najviša stopa otkrivanja LE stanica u SLE, ali se također pojavljuju u bolesnika s drugim sistemskim bolestima:

  • reumatoidni artritis,
  • đermatomitoze,
  • sustavna skleroderma.
Nastanak LE stanica posljedica je povrede imunološkog sustava, dokaz njegove autoagresije i posljedica je prisutnosti LE faktora u krvi.

LE-faktor - kompleks specifičnih cirkulirajućih imunoloških kompleksa (CIC) s antinuklearnom aktivnošću, koji uništavaju ne samo nuklearni materijal obrambenih stanica, već se i talože na zglobnim površinama, stijenkama krvnih žila, zadržavaju u bubrezima (lupusni nefritis) i imaju štetan učinak na ta tkiva,

Metoda analize

Krv za analizu LE stanica uzeta je iz vene na prazan želudac u volumenu od 10 ml. Da bi se spriječila dulja koagulacija krvi i da se ne mijenjaju njezina svojstva, dodaje se antikoagulant etilen diamin octene kiseline (EDTA). To vam omogućuje produženje roka trajanja krvi i dobivanje točnijih podataka.

EDTA se dodaje izravno u epruvetu prije uzorkovanja u koncentraciji od 1,5 mg antikoagulanta suhe tvari po 1 ml krvi. Postoje posebne tvornički izrađene epruvete, čiji su zidovi već obrađeni s EDTA u traženoj količini, što olakšava rad laboratorijskih tehničara.

EDTA cijev je pola puna krvi i ljuljačke za ravnomjernu raspodjelu antikoagulanta, a zatim nastavak punjenja do potrebne oznake. Nemoguće je protresti cijev, uzrokuje pjenjenje i oštećenje stanica.

Analiza je provedena u skladu s metodom Tsinkhoma-Conley, modifikacija u kojoj je napravljen od E.N. Novoselov.

Masa leukocita se oslobađa iz krvi, zatim se dobivena suspenzija filtrira kroz najsitnije sito ili protrese sa staklenim kuglicama. To je učinjeno kako bi se oštetila membrana leukocita. Nakon ovih manipulacija, epruveta s ispitnim materijalom inkubirana je jedan sat na 37 ° C.

Pojava LE stanica ukazuje na prisutnost antinuklearnih imunoloških kompleksa i potvrđuje autoimunu prirodu bolesti.

Za što je test LE stanica?

Analiza prisutnosti LE stanica provodi se kako za dijagnozu tako i za praćenje učinkovitosti liječenja sistemskog eritematoznog lupusa. Stanice se otkrivaju u ranom stadiju bolesti i tijekom pogoršanja. Mogu se naći ne samo u krvi, već iu mokraći, te u crvenoj koštanoj srži. Nakon imenovanja terapije, broj tih stanica reducira se na potpuni nestanak. Analiza LE stanica je pokazatelj ozbiljnosti i aktivnosti procesa, kao i uspjeha liječenja SLE.

Kod drugih sistemskih bolesti postotak LE stanica je vrlo mali, tako da je ova analiza manje važna.

LE stanice (krv s EDTA)

Autoimuna antitijela: LE stanice (krv s EDTA)

Analiza za otkrivanje u krvi takozvanih LE-stanica ili stanica sistemskog eritematoznog lupusa (SLE), stanica lupusa, jedan je od testova laboratorijske dijagnostike ove bolesti.

LE stanice su morfološki markeri sistemske autoimune bolesti, SLE. Oni predstavljaju neurofilne leukocite specifične morfologije, izražene u prisutnosti fagocitoznih fragmenata jezgre stanica u obliku bezstrukturne homogene formacije i jezgre vlastitog neurofila, pomaknutog na periferiju i u obliku polumjeseca.

Stvaranje takvih staničnih struktura rezultat je imunoloških događaja karakterističnih za sistemski eritematozni lupus, koji se javljaju u prisutnosti posebne frakcije imunoglobulina u krvnoj plazmi, LE-faktora s antinuklearnom aktivnošću.

Činjenica otkrivanja stanica lupusa u krvi ukazuje na prisutnost antinuklearnih antitijela u plazmi, što je, pak, pokazatelj autoimune prirode bolesti.

LE stanice su otkrivene u 40-90% slučajeva SLE i mnogo rjeđe (ne više od 10%) u drugim bolestima autoimune prirode, kako u krvi tako iu pleuralnim, perikardalnim, peritonealnim eksudatima, u cerebrospinalnoj tekućini.

Karakterizira se pojavom stanica lupusa u krvi pacijenata u ranim stadijima bolesti, kao iu razdoblju kada je došlo do pogoršanja, njihov broj ovisi o težini bolesti.

Uzimanje lijekova može dovesti do smanjenja broja LE stanica koje su otkrivene u krvnoj plazmi dok ne nestanu u potpunosti.

Indikacije za analizu

Metoda analize

Suština analize je identificirati stanice lupusa u razmazu krvi pacijenta pomoću mikroskopskog pregleda.

Kao materijal za studiju koristi se venska krv uzeta od pacijenta ujutro na prazan želudac i stavljena u EDTA cijev kao antikoagulant, prije početka terapije lijekovima.

Ova analiza je provedena primjenom Zinkhoma-Conley metode, modificirane od E.N. Novoselova. Tehnika uključuje stavljanje svježe prikupljene krvi pacijenta u epruvetu s EDTA antikoagulantom. Kao rezultat brojnih manipulacija, uključujući inkubaciju krvnih stanica, mehaničko djelovanje na njih, što doprinosi stvaranju LE-stanica, centrifugiranje, oslobađa se masa leukocita, iz čega se dobivaju pripravci. Oni su predmet fiksacije i bojenja hematološkim bojama. Metoda je prilično dugotrajna, ima određeni prag osjetljivosti, specifičnosti, reproducibilnosti.

Rezultati istraživanja i njihova interpretacija

Izostanak LE stanica u krvnim pripravcima je normalan.

Identifikacija stanica lupusa ukazuje na prisutnost bolesti autoimune prirode:

  • sistemski eritematozni lupus - iz pojedinačnih stanica, umjerenog broja, velikog broja, ovisno o stupnju bolesti;
  • sistemska skleroderma, mješovita oboljenja vezivnog tkiva, kronični hepatitis u aktivnoj fazi, dermatomiozitis, reumatoidni artritis - u malim količinama, nestalni.
Istraživanje prisutnosti ili odsutnosti LE stanica u krvi jedan je od dijagnostičkih testova za sistemski eritematozni lupus, koji se provodi zajedno s drugim specifičnim testovima.

Edta što je to analiza

Uzorci krvi

Glavni tip biološkog materijala koji se analizira je krv. Krv se sastoji od stanica (crvenih krvnih zrnaca, bijelih krvnih stanica i trombocita) i tekućeg dijela, koji je otopina mnogih anorganskih i organskih tvari. To je tekućina koja se analizira u većini laboratorijskih ispitivanja. Stoga, prvi korak nakon uzimanja uzoraka krvi i prije slanja u laboratorij je odvajanje tekućeg dijela krvi od stanica centrifugiranjem uzoraka. Tekući dio krvi, koji se dobiva nakon centrifugiranja, može biti plazma ili serum.

1. Cijela krv

Cijela krv je uzorak venske, arterijske ili kapilarne krvi u kojoj koncentracija i svojstva staničnih i intracelularnih komponenata ostaju relativno nepromijenjeni u usporedbi sa stanjem in vivo. Dodavanje antikoagulansa uzorku pune krvi stabilizira stanične i unutarstanične komponente tijekom određenog vremenskog razdoblja.

Serum - nerazdijeljena izvanstanična krv nakon završetka odgovarajućeg procesa zgrušavanja krvi. Za odvajanje seruma od krvnih stanica u uzorku krvi uzetog od pacijenta, vakuumsku cijev treba ostaviti na sobnoj temperaturi najmanje 30 minuta. Da bi se dobio uzorak visoke kvalitete, važno je izdržati vrijeme pune krvi. Ovo razdoblje može biti kraće ako se koristi aktivator koagulacije.

Prednosti korištenja seruma u usporedbi s plazmom posljedica su činjenice da dodavanje antikoagulansa može uzrokovati smetnje s nekim analitičkim metodama laboratorijske analize ili promijeniti koncentraciju određenih komponenata:

smjesa kationa u antikoagulansima: Nh5 +, Li +, Na +, K +;

smetnje analita uzrokovane vezanjem metala za EDTA i citrat (na primjer, smanjenje aktivnosti alkalne fosfataze tijekom vezanja cinka, smanjenje aktivnosti metaloproteinaze, inhibicija aktivacije stanica ovisnih o metalu tijekom funkcionalnih testova, vezanje ioniziranog kalcija na heparin);

interferencija fibrinogena u heterogenim imunološkim studijama;

inhibicija metaboličkih ili katalitičkih reakcija heparinom (na primjer, Taq polimeraza u lančanoj reakciji polimeraze);

interferencija EDTA, citrata s raspodjelom iona između intra- i međustaničnih prostora (na primjer, Cl-, Nh5 +);

Elektroforezu proteina treba provoditi samo u serumu.

Interferencija - interferencija vanjskog faktora u rezultatima analize.

Ako se antikoagulansi dodaju u vakuumsku cijev (vacutainer) s uzorkom krvi, krv ostaje tekuća (ne zgrušava se) i tekući dio dobiven nakon centrifugiranja naziva se plazma.

Prednosti korištenja plazme:

ušteda vremena: uzorci krvi mogu se centrifugirati odmah nakon primitka (nema potrebe čekati najmanje 30 minuta da se dobije serum);

izlaz plazme iz istog volumena krvi je 15-20% veći od seruma;

Prevencija uzrokovana smetnjama koagulacije kada se koristi serum.

Zbog promjena uzrokovanih zgrušavanjem krvi u vakuumskoj cijevi, neke studije daju pouzdane rezultate samo kada se koristi plazma (na primjer, neurospecifična enolaza, serotonin, amonijak).

Antikoagulansi su suplementi koji inhibiraju zgrušavanje krvi i / ili plazme, što osigurava da nema značajnih promjena u ispitivanim komponentama prije analitičkog procesa.

Koagulacija krvi sprječava se vezanjem kalcijevih iona (EDTA, natrijev citrat) ili inhibicijom aktivnosti trombina (heparin, hirudin). Krute ili tekuće antikoagulanse u vakuumskim epruvetama treba miješati s krvlju odmah nakon uzimanja uzoraka krvi.

EDTA je sol etilendiamintetraoctene kiseline. Koriste se dvije kalijeve (K2), tri-kalijeve (K3) i dinatrijeve (Na2) soli. Koncentracije: od 1.2 do 2.0 mg / ml krvi (od 4.1 do 6.8 mmol / l krvi) pri brzini bezvodne EDTA. Za hematološke studije poželjno je koristiti vakuumske cijevi s K2 EDTA, budući da osigurava veću stabilnost veličine krvnih stanica i ne razrjeđuje uzorak.

U vakuumskim epruvetama za proučavanje sustava hemostaze, koristi se tro-supstituirani natrijev citrat (dihidrotrinatrijum citrat Na3C6H5O7 * 2h3O):

0,105 mol / l; 3,13% (31,3 g / l);

0,109 mol / l; 3,20% (32,0 g / l);

0.129 mol / l; 3,80% (38,0 g / l).

Prema preporukama Svjetske zdravstvene organizacije i Nacionalnog odbora za standardizaciju u kliničkom laboratoriju (SAD), poželjno je upotrijebiti 0,109 mol / L (3,20%) trinatrijev citrat citronske kiseline. Za proučavanje učinka sustava hemostaze preporučuje se mješavina jednog dijela citrata s 9 dijelova krvi.

Za određivanje brzine taloženja eritrocita (ESR) koristi se 0,105 mol / L (3,13%) trinatrijev citrat citronske kiseline. U istraživanju ESR-a pomiješan je jedan dio citrata s 4 dijela krvi.

Kako bi se osigurala stabilnost uzoraka krvi za proučavanje hemostaze u vakuumskim epruvetama korištena su složena punila (natrijev citrat / teofilin, / adenozin / dipiridamol)., Epruvete sa kompleksnim punilom ne mogu se koristiti za ispitivanje agregacije trombocita. Omjer antikoagulansa / krvi u tim epruvetama je 1: 9 pri koncentraciji natrij citrata od 0,109 mol / L (3,20%). Vakuumske cijevi sa složenim punilom preporučuju se pri centraliziranju sustava hemostaze.

Za dobivanje standardizirane heparinizirane plazme preporučuje se od 12 do 30 međunarodnih jedinica (IU) / ml nefrakcioniranih natrijevih, litijevih ili amonijevih soli heparina molekulske mase od 3 do 30 kD.

Za određivanje ioniziranog kalcija preporučuje se heparin titriranog kalcija u koncentraciji od 40 do 60 IU / ml (suha heparinizacija) i 8 do 12 IU / ml krvi (tekuća heparinizacija).

Hirudin je antitrombin ekstrahiran iz pijavica ili dobiven genetičkom inženjerskom sintezom. Hirudin inhibira trombin, formirajući kompleks hirudin-trombina u omjeru 1: 1. Koristi se u koncentraciji od 10 mg / l.

COLOR CODE VACUUM CIJEVI S ANTIKOAGULANIMA

Standard ISO 6710 predstavlja sljedeće kodove boja za antikoagulante:

citrat za proučavanje hemostatskog sustava - blijedo plava / zelena;

citrat za brzinu taloženja eritrocita - crna / svijetloljubičasta;

bez dodataka (za serum) - crveno / bijelo.

Kodiranje boja poklopaca vakuumskih cijevi odgovara oznakama boja antikoagulanata koji se koriste u njima.

EDTA - opći opis svojstava, primjena u medicini i industriji

U koordinacijskoj kemiji, prijelazni metali se vežu za ione ili određene spojeve u vodenim otopinama. Ovi ioni su poznati kao ligandi, a zajedno se cijeli spoj naziva koordinacija. Nekoliko spojeva ima sposobnost da se veže za centralni atom metala više puta i opisuju ih kao polidentate, što se doslovno prevodi kao "mnogo nazubljeni". Ovi spojevi su opisani na ovaj način jer se vežu na središnji atom na nekoliko mjesta. Etilendiamintetraoctena kiselina (EDTA) je takav polidentatni ligand. Posebno, etilendiamintetraoctena kiselina (EDTA) je heksadentatni ligand, budući da heksa znači šest, a ligand je vezan šest puta.

Etilendiamintetraoctena kiselina (EDTA) - opći opis, svojstva

EDTA, ili etilendiamintetraoctena kiselina, veže ukupno 6 mjesta (4 kisika i 2 dušika) na ion u otopini. Molekule koje se vežu na nekoliko mjesta u koordinacijskom spoju nazivaju se keliranje.

Slika 1: Potpuno protonirani oblik EDTA4-, h5EDTA. Neprotonirana forma se formira u vezi s uklanjanjem atoma vodika na svakoj od četiri skupine karboksilnih kiselina. U ne-protoniranoj molekuli, etilendiamintetraoctena kiselina ima dodatne, nesparene elektrone na četiri atoma kisika koji imaju jednostruke veze s atomima ugljika i dva atoma dušika.

Kelati imaju tendenciju da budu više termodinamički stabilne molekule, a kelatni spojevi teže zamjeni monodentata u koordinacijskim spojevima u otopini. To je posebno uzrokovano činjenicom da su reakcije s povećanom entropijom spontane i da se "žele" više dogoditi. Na primjer, vidi sljedeći primjer jednadžbe u kojoj EDTA zamjenjuje vodene ligande:

Ovdje se vodeni kompleks željeza pretvara u molekulu željeza okruženu jednom molekulom etilendiamintetraoctene kiseline. To je zbog toga što na lijevoj strani jednadžbe postoje dvije molekule - složeni spoj željeza i etilendiamintetraacetatne kiseline - dok se na desnoj strani jednadžbe nalazi sedam molekula - novi kompleksni spoj željeza i šest molekula vode izmještenih s EDTA ligandom. Entropijski povoljne reakcije javljaju se spontano, a povećanje broja molekula je povećanje entropije. Prema tome, gornja reakcija se događa spontano, s vrijednošću K koja prelazi 1025. Opći trend, koji je logičan, znači da su polidentatni ligandi koji imaju više "zubaca" ili veznih točaka sa centralnim atomima termodinamički korisni / stabilni, i stoga se može upotrijebiti za zamjenu slabijih monodentatnih liganada. Etilendiamintetraoctena kiselina može vezati ukupno šest puta, kao što je naznačeno u gornjoj jednadžbi za željezo, na primjer, tako da je to vrlo dobra molekula koja istiskuje druge ligande.

Slika 2: EDTA molekula vezuje ukupno šest puta za zajednički središnji metal, označen slovom M. t Imajte na umu da atomi s nesparenim elektronima (dva atoma dušika i četiri atoma kisika) stvaraju te kovalentno-koordinacijske veze.

Industrijska uporaba etilendiamintetraoctene kiseline (EDTA)

Zbog dobrog premještanja molekula u koordinacijskim kompleksima, etilendiamintetraoctena kiselina može se koristiti za sprečavanje negativnih reakcija i štetnih učinaka na proizvode uzrokovane prisutnošću neželjenih metala u malim količinama. Ova je aplikacija poznata kao sekvestracija. Na primjer, što se tiče kozmetike, etilendiamintetraoctena kiselina služi za povećanje stabilnosti kozmetike s obzirom na molekule u zraku. Slično tome, u proizvodima za osobnu njegu i njegu kože, EDTA se veže na slobodne metalne ione i služi kao sredstvo za čišćenje i konzerviranje. To u osnovi smanjuje "tvrdoću" (ili prisutnost metalnih kationa) u vodi iz slavine, tako da drugi sastojci u šamponima i sapunima mogu obaviti svoj zadatak čišćenja učinkovitije. U istom smislu, etilendiamintetraoctena kiselina se koristi u deterdžentima za omekšavanje vode koja dolazi u dodir s njom, tako da se druge aktivne tvari mogu učinkovitije očistiti. U tekstilnoj industriji etilendiamintetraoctena kiselina sprječava obezbojenje obojenih tkanina uklanjanjem štetnih slobodnih metalnih iona, što također eliminira zaostale precipitacije u industrijskoj opremi koja se koristi na visokim temperaturama (tj. Pećima). Općenito, etilendiamintetraoctena kiselina smanjuje reaktivnost metala, sprječavajući bilo koje neželjene učinke koji mogu nastati zbog njegove prisutnosti. EDTA se koristi u obliku soli, najčešće u obliku dinatrijeve etilendiamintetraoctene kiseline ili kalcijeve dinatrijeve soli etilendiamintetraoctene kiseline.

Medicinska uporaba etilendiamintetraoctene kiseline (EDTA)

Osim industrijske primjenjivosti, etilendiamintetraoctena kiselina se također može koristiti u medicini. Liječnici mogu propisati etilendiamintetraoctenu kiselinu pacijentima koji pate od trovanja olovom. Ovaj tretman naziva se kelatorna terapija, u kojoj EDTA obrađuje toksične ione prisutne u tijelu u bezopasne. EDTA se primjenjuje intravenozno i ​​distribuira se kroz tijelo kroz krvotok. S obzirom na njegovu heksadentatnu prirodu, etilendiamintetraoctena kiselina ima molekularnu strukturu sličnu kandžama. Zahvaljujući toj strukturi, EDTA izbacuje toksične teške metale koji se nalaze u krvi i veže se na ione tih metala. Ovo vezanje tvori spoj koji se izlučuje iz tijela kroz urin, sprečavajući ih da dođu u kontakt s enzimima i citokromima. Terapija kelatorom može uključivati ​​skup postupaka i jedan postupak može trajati od jednog do tri sata. Terapija kelatorom ne samo da uklanja štetne ione iona iz tijela, već također može pomoći u sigurnom odlaganju iona žive, kroma, kobalta, nikla, cinka, arsena i talija iz krvotoka. U slučaju prekomjerne konzumacije digoksina, lijeka koji se koristi za liječenje fibrilacije atrija, atrijalnog flatera, pa čak i zatajenja srca, etilendiamintetraoctena kiselina se koristi za čišćenje krvotoka neiskorištenih iona.

Utjecaj etilendiamintetraoctene kiseline na okoliš

EDTA je vrlo korisna kao polidentatni ligand. Nažalost, trenutno je toliko široko u uporabi da se smatra zagađivačem okoliša. Konačno se razgrađuje na etilendiamintetraoctenu kiselinu, gubi jednu kiselinsku skupinu i postaje otrovna nakon što formira diketopiperazin. Razine etilendiamintetraacetatne kiseline se trenutno promatraju tehnikama analize masene spektrometrije, iako se smatra da je razina akutne toksičnosti vrlo niska.

  1. Koliko puta se etilendiamintetraacetatna kiselina veže u koordinacijskom kompleksu?
  2. U kojem redoslijedu (u silaznom redoslijedu) su termodinamički stabilne tvari raspoređene kao ligandi: ONO, en (etilendiamin), EDTA.
  3. Koji su najčešći oblici etilendiamintetraacetatne kiseline?
  4. Zašto se etilendiamintetraoctena kiselina tako široko koristi? Zašto je to problem?
  5. Što se profesor Larsen obično odnosi na etilendiamintetraoctenu kiselinu?
  1. EDTA je heksadentatni ligand, što znači da se veže šest puta. Veže se dva puta s ionima s dušikom i četiri puta s ionima kisika.
  2. EDTA (koja se veže šest puta), en (koja se veže dva puta), ONO (koja se jednom veže)
  3. EDTA se najčešće koristi u obliku soli i u suhom obliku.
  4. EDTA je izvrstan kelacijski agens koji omogućuje višestruko vezanje u koordinacijskom kompleksu. To mu daje mogućnost da premjesti druge neželjene ligande zbog entropije i termodinamike, te je stoga široko korišten u laboratorijima, tvornicama i također u medicini. Problem s njegovim prekomjernim širenjem je da se razgrađuje u toksin. Koristeći EDTA u velikoj mjeri, stvara se više toksina koji ostaju u okolišu.
  5. "Kraken" jer je to konačni ligand (veže se šest puta, što je vrlo veliki pokazatelj vezanja liganda).

Potpuna krvna slika + formula leukocita + ESR (krv s EDTA)

Opća analiza s formulom leukocita. Koncept općeg krvnog testa uključuje skup pokazatelja koji omogućuju procjenu hematopoetskog sustava, koncentracije hemoglobina u krvi, identificiranje upalnih reakcija itd.

Potpuna krvna slika je prvo obvezno laboratorijsko ispitivanje koje se dodjeljuje bilo kojoj osobi, bez obzira na dob, svrhu istraživanja, predloženu bolest.

Hemoglobin (Hb) je kompleksni protein koji je glavna komponenta crvenih krvnih stanica. Hemoglobin je uključen u procese vezanja i transporta kisika. Ne samo da prenosi kisik iz pluća u periferna tkiva, već i ubrzava transport ugljičnog dioksida iz tkiva u pluća. Koncentracija hemoglobina kod zdrave osobe ovisi o dobi i spolu. U patologiji, razina hemoglobina može značajno varirati. Tako se u raznim tipovima anemije uočava smanjenje hemoglobina, čija se priroda ocjenjuje po nekoliko laboratorijskih parametara i kliničkih podataka. Povećane vrijednosti: - eritremija - krvne bolesti s prekomjernom sintezom eritrocita - simptomatska eritrocitoza (na primjer, s oštećenjima srca, teškom kardiopulmonalnom insuficijencijom, bolesti bubrega, tijekom boravka u visokim planinama).

Crvene krvne stanice, ili crvene krvne stanice, su stanice bez jezgre. Glavna funkcija crvenih krvnih stanica je transport kisika i ugljičnog dioksida. Tu funkciju daje poseban pigment - hemoglobin, koji u svom sastavu ima željezo. Osim toga, crvena krvna zrnca su uključena u transport aminokiselina, antitijela, toksina i brojnih ljekovitih tvari. Broj crvenih krvnih stanica jedan je od najvažnijih pokazatelja općeg krvnog testa. Smanjenje broja crvenih krvnih stanica u krvi (crvene krvne stanice) jedan je od znakova anemije. Stupanj eritrocitopenije varira s različitim oblicima anemije. Dakle, u slučaju anemije zbog nedostatka željeza zbog kroničnog gubitka krvi, broj crvenih krvnih stanica može biti normalan ili neznatno smanjen. Kod akutnog gubitka krvi, B12-deficijentne, hipoplastične i hemolitičke anemije, broj crvenih krvnih stanica u krvi značajno se smanjuje, što može zahtijevati hitne medicinske mjere (transfuzije krvi, itd.). Osim anemije, može se primijetiti relativno smanjenje broja eritrocita s povećanjem cirkulirajuće krvi tijekom trudnoće (ali češće je prisutna anemija deficita željeza kod trudnica), prekomjerna hidratacija (višak tekućine, na primjer, masivna infuzija otopina, akutno zatajenje bubrega, itd.) I neki drugi uvjeti., Povećanje broja eritrocita u krvi (eritrocitoza) jedan je od tipičnih znakova eritremije (krvna bolest s prekomjernom sintezom eritrocita). Osim toga, povećanje broja crvenih krvnih zrnaca često se primjećuje kod kroničnih plućnih bolesti, oštećenja srca, prisutnosti abnormalnih hemoglobina, prekomjernog fizičkog napora, izloženosti velikim visinama, pretilosti. Neke maligne bolesti jetre i bubrega također mogu biti praćene eritrocitozom. Relativna eritrocitoza (zbog smanjenja volumena cirkulirajuće krvi) može se uočiti tijekom dehidracije (dehidracije), alkoholizma i nekih drugih stanja. Indeksi eritrocita izračunate su vrijednosti koje omogućuju kvantitativno obilježavanje važnih pokazatelja stanja eritrocita. MCV - znači volumen crvenih krvnih zrnaca (srednji volumen stanice). To je točniji parametar od vizualne procjene veličine crvenih krvnih stanica. Međutim, nije pouzdan s velikim brojem crvenih krvnih stanica s modificiranim oblikom. Na temelju vrijednosti MCV, razlikuju se mikrocitična anemija (nedostatak željeza, talasemija), normocitika i makrocitika. Mikrocitoza je karakteristična za anemije manjak željeza, makrocitozu - za B12 i nedostatak folija. Aplastična anemija je normalna ili makrocitna. Povećana: - Megaloblastična anemija (B12-deficijentna, folna deficijencija) - Makrocitoza (aplastična anemija, hipotireoza, bolest jetre, metastaze malignih tumora) - Pušenje i konzumacija alkohola Smanjenje MCV: - Hipokromne i mikrocitične anemije (anemija) ) - Hemoglobinopatije - hipertireoidizam (rijetko) MCH - srednji sadržaj hemoglobina u eritrocitu (srednja razina hemoglobina). Izračunava se u apsolutnim jedinicama dijeljenjem koncentracije hemoglobina s brojem crvenih krvnih stanica. Ovaj parametar određuje prosječan sadržaj hemoglobina u jednom eritrocitu i sličan je indeksu boje, ali točnije odražava sintezu Hb i njegovu razinu u eritrocitu. Na temelju tog indeksa, anemija se može podijeliti na normo, hipo i hiperkromno. Normochromia je karakteristična za zdrave ljude, ali se može pojaviti i kod hemolitičke i aplastične anemije, kao i kod anemije povezane s akutnim gubitkom krvi. Hipokromija je uzrokovana smanjenjem volumena eritrocita (mikrocitoza) ili smanjenjem razine hemoglobina u eritrocitu u normalnom volumenu. tj Hipokromija se može kombinirati s smanjenjem volumena eritrocita ili se može uočiti s normalnom i makrocitozom. Hiperkromija ne ovisi o stupnju zasićenja eritrocita hemoglobinom, već je uzrokovana samo količinom crvenih krvnih stanica. Povećana MSN: - Megaloblastična anemija (vitamin B12 i folni nedostatak) - Bolest jetre - False elevacija (multipli mijelom, hiperleukocitoza) MCH smanjenje: Anemija manjak željeza MCHC (srednja koncentracija hemoglobina u stanici) je prosječna koncentracija hemoglobina u eritrocitu. Izračunava se dijeljenjem koncentracije hemoglobina u krvi (u g / 100 ml) s hematokritom i umnožavanjem sa 100. Indikator odražava zasićenje eritrocita hemoglobinom; karakterizira omjer hemoglobina prema volumenu stanica. Stoga ne ovisi o volumenu stanice, za razliku od MCH. Povećana MCHC: Kongenitalna sferocitoza i druga sferocitna anemija Smanjena MCHC: - Anemija deficita željeza - Talasemija - Neke hemoglobinopatije Hematokrit odražava udio crvenih krvnih stanica u ukupnom volumenu krvi. Porast koncentracije je uočen kod eritrocitoze, dehidracije (bolesti gastrointestinalnog trakta, praćene obilnim proljevom, povraćanjem, dijabetesom), smanjenjem volumena cirkulirajuće plazme (peritonitis, opekotina). Smanjuje se smanjenje anemije, povećanje volumena cirkulirajuće plazme (kardiovaskularna i bubrežna insuficijencija, kasna gestacijska trudnoća), kronični upalni procesi, ozljede, dugotrajno mirovanje, post i onkološke bolesti. Leukociti ili bijele krvne stanice formiraju se u koštanoj srži i limfnim čvorovima. Njihova glavna funkcija je zaštita od stranih agenata. Određene vrste leukocita osiguravaju uništavanje mikroba, stranih tvari i produkata razgradnje stanica, kao i sudjelovanje u formiranju imuniteta. Te su stanice sposobne za aktivno kretanje. Šire se krvotokom cijelog tijela, prodiru u različite organe i tkiva gdje su najaktivniji. Leukociti su heterogeni, među njima postoje različite vrste stanica, čiji se broj može procijeniti prema formuli leukocita. Sadržaj leukocita u krvi je važan dijagnostički pokazatelj. Njihov broj ovisi o formiranju tih stanica u koštanoj srži i brzini njihovog oslobađanja u tkivo. Kod zdrave osobe broj leukocita može značajno varirati ovisno o unosu hrane, fizičkom i mentalnom stresu. Povećanje broja leukocita u perifernoj krvi naziva se leukocitoza. Glavni uzroci leukocitoze su: infekcije (bakterijske, gljivične, virusne); bilo koja upalna stanja; trauma; bolesti krvi (leukemije, u kojima se broj leukocita u krvi povećava deset puta); maligne neoplazme. Smanjenje broja leukocita u krvi naziva se leukopenija. Bolesti i stanja praćena leukopenijom: - virusne infekcije (ospice, rubeole, zarazne mononukleoze itd.); - aplazija i hipoplazija koštane srži, - inhibicija njenih funkcija tijekom produljene polikemoterapije, zračenja itd.; - dugotrajna uporaba određenih antibakterijskih, protuupalnih, antikoagulantnih lijekova; - ionizirajuće zračenje; Iscrpljivanje rezervi koštane srži leukocita kod nekih dugotrajnih akutnih infekcija (tifus, paratif, salmoneloza itd.). Leukocitna formula je postotak različitih vrsta leukocita u krvi. Proučavanje formule leukocita važan je laboratorijski test koji daje dijagnostičke informacije o prirodi mnogih bolesti, ozbiljnosti bolesnikovog stanja, učinkovitosti liječenja. U leukocitnoj formuli određuju se sljedeće vrste leukocita: Neutrofili štite organizam od infekcija. Najčešće se povećava broj neutrofila s akutnim upalnim, infektivnim bolestima, s nekrozom tkiva, intoksikacijom. Eozinofili su uključeni u razvoj alergijskih reakcija. Njihov se broj najčešće povećava kod alergijskih stanja i helmintskih invazija, rjeđe kod tumora i nekih bolesti kolagena. Bazofili su uključeni u alergijske i upalne reakcije. Njihov se broj povećava s bilo kojom alergijskom bolešću, nekim krvnim bolestima, hipotiroidizmom, itd. Limfociti su glavne stanice imunološkog sustava, osiguravajući odgovarajući imunološki odgovor organizma kada ga uzmu strani agenti. Sadržaj limfocita u krvi raste s infektivnom mononukleozom, mnogim drugim virusnim infekcijama, kao i bolestima limfnog sustava i krvi. Monociti su stanice koje osiguravaju fagocitozu, tj. "Proždiru" vanzemaljske mikroorganizme. Monocitoza - povećanje broja monocita - karakteristično je za mnoge infekcije: tuberkulozu, infektivnu mononukleozu, sepsu. Nalazi se u krvnim bolestima, kolagenskim bolestima. Trombociti su krvni trombociti, čija je glavna funkcija stvaranje tromba. Trombociti se mogu "zalijepiti" za oštećeni dio vaskularnog zida, držati se zajedno i tako tvoriti primarni tromb, koji se kasnije pojačava faktorima zgrušavanja plazme. Uz nedostatak trombocita, ti procesi su narušeni, a osoba se pojavljuje krvarenje. Najčešće se smanjuje razina trombocita u: - krvnim bolestima (neke vrste anemije, akutne leukemije itd.) - nasljedni nedostatak trombocita - autoimune bolesti (antifosfolipidni sindrom, kolagenoza, itd.) - neke infekcije (prolazna trombocitopenija u septičkim procesima, virusne infekcije) ) - metastatska lezija koštane srži - učinci lijeka (uzimanje aspirina i drugih antitrombocitnih sredstava, nekih antibakterijskih sredstava itd.). Možda blagi kratkotrajni pad broja trombocita u krvi tijekom predmenstrualnog razdoblja i prvih dana menstruacije. Povećanje broja trombocita karakteristično je za mnoge maligne procese, neke bolesti krvi i infekcije. Relativna trombocitoza je moguća s zgušnjavanjem krvi (na primjer, dehidracijom).

Vodič o "uzimanju krvi iz periferne vene"

Spremite vezu u nekoj od mreža:

4.2.2. Vakuumske cijevi: vrste, kodiranje u boji

Vakuumske cijevi su glavna komponenta za uzimanje venske krvi. Epruvete su izrađene od stakla ili posebnog materijala polietilen-terftalata (plastika i staklo), što je posebno izdržljivo i sprječava izmjenu plina. Proizvode se i steriliziraju u tvornici, namijenjene za jednokratnu uporabu. Cijevi su dostupne u različitim količinama i veličinama i već sadrže sve reagense i aditive potrebne za analizu. Vakuumske cijevi osiguravaju uzimanje potrebne količine krvi i, sukladno tome, osiguravaju pravilan odnos krvi i reagensa.

Epruveta se sastoji od tri glavna dijela:

sigurnosni pokrov s identifikacijskim prstenom;

Vakuumske epruvete s punilom (ne reagensom) sadrže gel ili granule i koriste se u slučajevima kada je potrebno odvojiti komponente krvi. Gel obuhvaća kondenziranu krv, odvajajući je od seruma, granule se pretvaraju u neku vrstu barijere, djelujući poput gela.

Za neke vrste ispitivanja dodan je reagens (litij, heparin, EDTA).

Vakuumske cijevi su zatvorene gumenim čepovima ili posebnim Hemogardovim kapama, koje osiguravaju sigurnost tehničara pri radu s uzorkom. Boja poklopca označava vrstu punila i svrhu cijevi. Kodiranje boja cijevi odgovara međunarodnoj normi ISO 6710.

Epruvete za serum

Krvni serum je najčešće korišteni materijal u kliničkim dijagnostičkim laboratorijima. Za serum, krv mora biti potpuno zgrušana.

Epruvete za serum su dvije vrste - staklo i plastika. U staklenim cijevima, funkcija aktivatora koagulacije izvodi se izravno staklom, budući da sadrži silicij, koji ubrzava proces koagulacije. Aktivatori koagulacije - silicijev dioksid i / ili trombin dodaju se u plastične cijevi kako bi se ubrzao proces koagulacije. Cijevi mogu također sadržavati poseban gel ili granule za jasno odvajanje seruma od kondenzirane krvi.

Staklene cijevi bez punila i plastične cijevi sa silikom za proučavanje sirutke odlikuju se crvenom kapicom (sl. 5, a). Epruvete za dobivanje seruma s trombinom razlikuju se bojom poklopca ili gumenog čepa narančaste boje (slika 5, b, c). Trombin je prirodni aktivator koagulacije i značajno smanjuje vrijeme stvaranja ugruška (3-5 minuta). Trombinske cijevi se koriste za ubrzavanje proizvodnje seruma, pa se najčešće koriste za brze testove, kada je hitno potrebno dobiti informacije o sastavu krvi pacijenta, na primjer, u jedinici intenzivne njege itd.

Proizvode se staklene cijevi, koje sadrže samo trombin, i plastične cijevi sa kompleksnim punilom - trombin sa silicijevim dioksidom. Također proizvedene cijevi s trombinom i gelom, vrijeme zgrušavanja u kojem je 3-5 minuta.

Nakon što ste napunili epruvetu trombinom, pazite da se miješa obrtanjem 5-6 puta. Do potpunog zgrušavanja krvi dolazi za 5 minuta.

Epruvete s gelom za dobivanje i odvajanje seruma izrađene su samo od plastike i mogu se razlikovati po žutoj kapi (sl. 5, d). Kako bi se bolje odvojio krvni ugrušak od seruma, u epruvete je dodan gel. Nakon uzorkovanja, plastične epruvete treba miješati preokretanjem 5–6 puta.

Sl. 5. Epruvete za serum:

a - s aktivatorom zgrušavanja (plastikom);

u - s trombinom i gelom;

Epruvete za istraživanje plazme

Za dobivanje plazme u epruvetama koristi se litijeva ili natrijeva sol heparina raspršena na unutarnju površinu epruvete. Heparinizirana plazma se obično koristi za biokemijsku i imunološku analizu.

Glavni učinak heparina je inhibicija prijelaza topljivog fibrinogena u netopljivi fibrin zbog blokiranja aktivnosti trombina.

Epruvete bez heparina (litijev heparin ili natrijev heparin) razlikuju se po zelenoj boji kapice. Litijev heparin se koristi za kliničke testove krvi, natrij heparin se koristi za odabir doze i praćenje terapije litijem. Epruvete s heparinom i gel za odvajanje za dobivanje plazme imaju svijetlozelenu kapicu, a koriste samo litijevu sol heparina. Odmah nakon punjenja cijevi i njenog uklanjanja iz držača, uzorak se mora temeljito izmiješati preokretanjem 8-10 puta. Centrifugiranje treba obaviti odmah nakon uzimanja krvi.

Sl. 6. Epruvete za plazmu: a - s heparinom; b - s heparinom i gelom.

Epruvete za koagulološka istraživanja

Kod uzimanja uzoraka za ispitivanje hemostatskog sustava, natrijev citrat je standardni antikoagulant. Njegov mehanizam djelovanja temelji se na vezanju ioniziranog kalcija u krvi, što dovodi do reverzibilne blokade procesa koagulacije.

Proizvode se i staklene i plastične cijevi s plavom kapicom (Sl. 7). Da bi se spriječilo isparavanje natrijevog citrata, plastične cijevi se proizvode posebnom tehnologijom iz raznih vrsta plastike i imaju dvostruke stijenke.

Vrlo je važno promatrati točan odnos krvi prema antikoagulantu kao 9: 1. Nedostatak citrata u uzorku dovodi do stvaranja mikrobunchea i koagulacije uzorka, a višak - da izobliči rezultate zbog vezanja kalcija iz reagensa.

Kada uzimamo uzorke u nekoliko epruveta od jednog pacijenta, epruvetu s citratom treba napuniti prije epruvete s aktivatorom zgrušavanja. Odmah nakon uzorkovanja, cijev treba pažljivo pomiješati 4-5 puta.

CTAD kompleksne epruvete za punjenje (natrijev citrat / teofilin / adenozin / dipiridamol) također se mogu koristiti za neke testove koagulacije.

Sl. 7. Epruvete s natrijevim citratom.

Epruvete za hematološko ispitivanje

EDTA (kalijeva sol etilendiamintetraoctene kiseline) koristi se kao antikoagulant u epruvetama za hematološka ispitivanja pune krvi. Antikoagulantno djelovanje EDTA osigurava se vezanjem kalcijevih iona u krvi. U epruvetama sa svijetlo ljubičastom (jorgovanom) kapicom, antikoagulant je u obliku otopine ili praha koji se raspršuje na unutarnju površinu epruveta (Sl. 8).

Kako bi se osigurao pravilan omjer krvi i antikoagulantne epruvete s EDTA, treba napuniti točno određeni volumen. Nedostatak EDTA u uzorku dovodi do njegove koagulacije, a višak - do nabiranja krvnih stanica i iskrivljavanja kliničkih pokazatelja kao što su hematokrit, veličina stanica itd.

Odmah nakon uzimanja krvi u epruvetu s EDTA, ona se mora temeljito izmiješati, okrenuti 8-10 puta.

Sl. 8. Epruvete za hematološko ispitivanje pune krvi.

Epruvete za posebna ispitivanja

Cijevi za ispitivanje glukoze

Za stabilizaciju glukoze koriste se epruvete sa sivom kapom i sljedeća punila: natrijev fluorid i kalijev oksalat, jodoacetat i litijev heparin, natrijev fluorid i EDTA.

Cijevi se moraju potpuno napuniti do volumena naznačenog na njima. Nakon uzorkovanja epruvete treba miješati, okrećući 6-8 puta. Budući da su cijevi za fluorid / oksalat posebno sklon hemolizi, one se moraju pomiješati s velikim oprezom.

Sl. 9. Ispitajte epruvete za ispitivanje glukoze.

Epruvete za istraživanje mikroelemenata

Elementi u tragovima nalaze se u krvi u iznimno malim količinama, tako da korišteni materijali isključuju mogućnost kontaminacije uzorka stranim tvarima. To je moguće uz pomoć posebnih cijevi s plavom kapicom (Sl. 10).

Epruvete su namijenjene proučavanju cinka, željeza, bakra, kalcija, selena u krvi; kao i toksikološka ispitivanja olova, kadmija, arsena, antimona.

Uzorkovanje i priprema uzoraka provode se prema upotrijebljenom punilu: mogu biti s aktivatorom zgrušavanja, K2-EDTA ili natrijevim heparinom ili bez punila. U analizi seruma za prisutnost elemenata u tragovima u tragovima, ne preporučuje se uporaba standardnih epruveta s crvenom kapom, jer sadrže povećanu koncentraciju cinka i drugih elemenata u tragovima.

Prilikom uzimanja krvi iz jednog pacijenta u nekoliko vakuumskih cijevi odjednom, potrebno je napuniti epruvetu za elemente u tragovima kako bi se smanjila vjerojatnost kontaminacije uzorka kroz iglu.

Sl. 10. Epruvete za istraživanje mikroelemenata.

Epruvete za istraživanje nestabilnih hormona proteina

Kako bi se očuvali nestabilni enzimi i proteinski hormoni u epruvetama, inhibitor proteaze, aprotinin, koristi se s EDTA antikoagulantom u epruvetama. Upotrebljava se za stabilizaciju hormona i enzima kao što su renin, adrenokortikotropni hormon, glukogon, somatostin, kalcij tonin, osteokalcin, b-endorfin, sekretin, neurotensin, vazoaktivni intestinalni peptid. Aprotinin se nalazi u 5-10 ml epruvetama s ružičastim čepom.

Epruvete za određivanje krvne grupe s ružičastom kapom

Ove se cijevi koriste i za testove krvne grupe i transfuzijske presjeke. Dostupan bez punila, sa silikom (aktivator koagulacije) ili K2EDTA. Posebna oznaka na epruveti prikladna je za bilježenje podataka o davatelju i pacijentu.

Sl. 11. Epruvete za određivanje krvne grupe.

Epruvete za stabilizaciju pune krvi (za imunohematologiju)

Cijevi za stabilizaciju cijele krvi sadrže kombiniranu ACD pomoćnu tvar koja se sastoji od aktivnog antikoagulanta trinatrijevog citrata, limunske kiseline, koja osigurava otopinu pufera s trinatrijevim citratom, i dekstroze, hranjive tvari za crvene krvne stanice. ACD staklene cijevi mogu se razlikovati po svijetlo žutoj kapi, obično se koriste u imunim hematološkim jedinicama za analizu površinskih antigena leukocita (HLA tipizacija, neke protočne citometrije, testovi funkcije leukocita i posebni imunološki testovi).

U cijevima je ACD punilo prisutno kao otopina (tip A ili B). Puna se krv pomiješa s uzorkom u omjeru 1: 6 (1 dio ACD obje koncentracije na 6 dijelova uzorka).

Odmah nakon punjenja epruvete s ACD, uzorak se mora temeljito izmiješati preokretanjem 8-10 puta.

Sl. 12. Staklene cijevi s ACD za imunohematologiju.

Epruvete za mjerenje ESR-a metodom Westergrena

Sustav za određivanje brzine taloženja eritrocita (ESR) prema Westergrenovoj metodi sastoji se od vakuumskih cijevi za uzimanje venske krvi i stativa s stupnjevanom skalom.

Sterilne staklene cijevi, zatvorene crnom Hemogard kapom, sadrže otopinu natrijevog citrata. Kada je epruveta potpuno napunjena krvlju (5,2 ml), odnos krvi prema antikoagulantu je 4: 1.

Tronožac je dizajniran za 10 epruveta, svaka ćelija je opremljena mehanizmom kojim se razina uzorka u epruveti kombinira s nultom razinom skale stativa. Mjerenje ESR-a provodi se u zatvorenoj primarnoj cijevi, a uzorak se ne treba sipati i dalje razrijediti.

Čuvajte uzorak do analize na sobnoj temperaturi, daleko od sunčeve svjetlosti i grijača. Analiza se mora provesti unutar 6 sati nakon uzorkovanja. Da biste to učinili, epruveta se stavlja u poseban stativ, stoji na ravnoj horizontalnoj površini. Tijekom cijelog razdoblja ispitivanja, tronožac mora ostati nepomičan. Zatim kombinirajte nultu oznaku s meniskusom uzorka i nakon 60 minuta zabilježite vrijednosti ESR na stupnjevanoj skali tronošca između eritrocita i plazme.

Sl. 13. BD Seditainer sustav za određivanje ESR prema Westergren metodi.

Epruvete za molekularnu dijagnostiku

Epruvete za plazma i molekularne dijagnostičke testove

Ove plastične sterilne epruvete koriste se za prikupljanje krvi, pripremu uzoraka, transport i skladištenje nerazrijeđenog uzorka plazme. Cijevi se razlikuju u biserno-bijelom poklopcu i koriste se za određivanje količine virusa u HIV infekciji i virusnom hepatitisu, kao i za provođenje analiza pomoću molekularnih dijagnostičkih metoda (na primjer, PCR) i idealne su za skladištenje i transport plazme.

Epruvete sadrže antikoagulant K2EDTA u obliku praha, raspršuje se na stijenke epruvete i poliesterski gel, što omogućuje odvajanje plazme od krvnih stanica tijekom centrifugiranja.

Sl. 14. Cijevi za odvajanje plazme s K2EDTA i gelom

Odmah nakon punjenja epruvete i njenog uklanjanja iz držača, krv se mora temeljito izmiješati s antikoagulantom, nježno okrenuti 8-10 puta. Uzorak prije centrifugiranja treba čuvati na sobnoj temperaturi ne dulje od 2 sata, dalje od sunčeve svjetlosti i uređaja za grijanje.

Plazma u epruvetama može se čuvati zamrznuta na -70 ° C. U epruvetama, stabilnost HIV RNA i virusa hepatitisa C se održava 72 sata na sobnoj temperaturi.

Epruvete za izolaciju mononuklearnih krvnih stanica (monociti i limfociti)

Epruvete omogućuju odvajanje mononuklearnih stanica periferne krvi u jednom koraku, te u jednoj primarnoj cijevi, čije su unutarnje stijenke prekrivene silikonom kako bi se smanjila nespecifična aktivacija stanica.

Epruvete su dostupne u dvije vrste:

s plavo-crnim kariranim plutom (epruvete s natrijevim citratom);

s crveno-zelenim šarenom čepom (natrijeve cijevi heparinom).

Epruvete sadrže gel za odvajanje antikoagulanta i poseban tekući fikol, stvarajući gradijent gustoće za odvajanje mononuklearnih stanica. Te su cijevi namijenjene za:

studije kvantitativnih i funkcionalnih značajki mononuklearnih stanica, studije njihove aktivnosti,

otkrivanje malignih neoplazmi,

analiza genetskih biljega,

istraživanje proviralne DNA, RNA virusa (uključujući HIV).

Odmah nakon uklanjanja epruvete s krvlju iz držača, ona se mora lagano okrenuti 8-10 puta. Uzorak prije centrifugiranja treba čuvati na sobnoj temperaturi ne dulje od 2 sata, dalje od sunčeve svjetlosti i uređaja za grijanje.

Dodatni Članci O Embolije